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使用蛋白層析柱,要注意接頭可不能漏氣

發布時間:2022-05-13瀏覽:301次

  蛋白層析柱是凝膠層析技術中的主體,我們研究所用的就是同興玻璃儀器,一般用玻璃管或有機玻璃管。根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數不同,從而分離的一種層析法。
 
  蛋白層析柱是凝膠層析技術中的主體,一般用玻璃管或有機玻璃管。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時應將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外,直徑加大,洗脫液體體積增加,樣品稀釋度大。
 
  層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時應將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外,直徑加大,洗脫液體體積增加,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床要有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關,但由于軟凝膠柱過高擠壓變形阻塞,一般不超過1米。
 
  注意事項:
 
  1、各接頭不能漏氣,連接用的小乳膠管不要有破損,否則造成漏氣、漏液。
 
  2、裝柱要均勻,既不過松,也不過緊,要在要求的操作壓下裝柱,流速不宜過快,避免因此壓緊凝膠。
 
  3、始終保持柱內液面高于凝膠表面,否則水分蒸發,凝膠變干。也要防止液體流干,使凝膠混入大量氣泡,影響液體在柱內的流動。
 
  4、所用凝膠比較昂貴,需小心操作,實驗后回收,盡量避免浪費和損失。

 

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